Wissen, was drin ist:

Lokale Verträglichkeit

Toxikologische Einstufung von Chemikalien ganz ohne Tierversuche

Die Beurteilung der lokalen Verträglichkeit ist wichtig für alle neuen Medikamente, sei es für die Applikationsstelle (humanen Toxikologie) oder andere Orte, an denen ein unbeabsichtigter oder zufälliger Kontakt auftreten kann. Die Beurteilung der Applikationsstelle sollte erfolgen, bevor klinische Studien beginnen, aber Änderungen der Formulierung oder neue Expositionswege könnten eine erneute Beurteilung auslösen, insbesondere wenn ein neuer Hilfsstoff eingeführt wird. Orte für mögliche zufällige Exposition sollten beurteilt werden, bevor größere klinische Studien gestartet werden.

Wie im ICH M3(R2) angegeben, sollten in vivo Stand-alone-Tests für die lokale Verträglichkeit vermieden werden. Tests können jedoch in in vivo wichtigen Studien durchgeführt werden. Neuere Richtlinien, z.B. EMA/CHMP/SWP/2145/2000 Rev. 1, Corr. 1, besagen, dass in vivo Tests nicht durchgeführt werden sollten, bevor alternative Datenquellen, z.B. aus Literatur, in silico Bewertungen oder in vitro/ex vivo Tests, in Betracht gezogen wurden. Dies entspricht dem 3R-Prinzip (Verfeinern, Reduzieren, Ersetzen) zur Verwendung von Alternativen zum Tiermodell. In vitro und ex vivo Tests werden ebenfalls zunehmend akzeptiert, um aktive Substanzen, Verunreinigungen und Formulierungen bereits vor nichtklinischen Tests zu untersuchen.

In vitro Testmethoden sollten international validiert und vorzugsweise von der OECD übernommen werden. Sie könnten auch Teil definierter Testansätze sein, um eine umfassendere Bewertung des Potenzials eines Medikaments zur Auslösung von Reizungen zu ermöglichen.

Heute gibt es eine breite Palette von in vitro Tests und für verschiedene Applikationsstellen oder Kontaktorte. Wir bieten viele dieser Tests an und führen regelmäßig neue Prüfsysteme ein, um flexiblere Teststrategien zu ermöglichen und mit den unterschiedlichen physikalisch-chemischen Eigenschaften von aktiven Substanzen, Verunreinigungen und Hilfsstoffen umzugehen.

Wenn Sie Unterstützung benötigen, um die geeignetste Teststrategie für Ihre aktive Substanz, Verunreinigungen oder Formulierung zu finden, melden Sie sich gerne.

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Hautsensibilisierung – Komplexer Prozess, der In Vitro bewertet werden kann

Die Hautsensibilisierung (verzögerte Reaktion) ist ein komplexer Prozess in mehreren Schritten, wie in einem Adverse Outcome Pathway (AOP) beschrieben. Nach dem Eindringen einer allergenen Substanz in die Haut wird der AOP in mehrere sogenannte Schlüsselereignisse unterteilt:

Reaktion einer Substanz mit Komponenten in der Haut (Proteine) unter Bildung von Komplexen
Aufnahme der Komplexe durch Langerhans-Zellen, einen Subtyp von dendritischen Zellen (DCs), Reifung der DCs und systemische Migration der DCs
Aktivierung und Proliferation von T-Zellen durch Interaktion mit reifen DCs
Freisetzung von proinflammatorischen Zytokinen bei erneuter Exposition gegenüber dem Allergen, die eine lokalisierte Gewebeentzündung und die klinische Manifestation einer allergischen Kontaktdermatitis auslöst
Entzündungskaskade

In den letzten Jahren wurden neue Ansatzmethoden (NAMs) für die Bewertung des Sensibilisierungspotentials von Chemikalien entwickelt und in den OECD-Testleitlinien 442C/D/E sowie OECD 497 veröffentlicht. Wir bieten Ihnen Testpakete, die alle Schlüsselereignisse abdecken:

Der Direct Peptide Reactivity Assay (DPRA) und der Amino Acid Derivative Reactivity Assay (ADRA) adressieren die kovalente Bindung einer Chemikalie an Proteine
Die ARE-Nrf2-Luciferase-Testmethode (LuSens) misst die Aktivierung von Keratinozyten
Der human Cell Line Activation Test (h-CLAT) und der U-SENS™ Assay untersuchen die Aktivierung von DCs

Das Sensibilisierungspotential kann anhand der Ergebnisse dieser Tests bestimmt werden, aber manchmal können die Anwendungsbereiche der Tests die Prüfung von Substanzen mit bestimmten physikochemischen Eigenschaften einschränken.

Wenn die in chemico oder in vitro Methoden nicht angewendet werden können, kann der Local Lymph Node Assay (LLNA) als Alternative verwendet werden. Dieser in vivo Test bewertet die Proliferation von T-Zellen in Lymphknoten bei Mäusen nach dermaler Anwendung. Der LLNA liefert robuste quantitative Daten, die für eine Dosis-Wirkungs-Analyse geeignet sind. Auch ein Schwellenwert kann zur Unterstützung der Risikobewertung bestimmt werden.

Phototoxikologie

Phototoxizitätsbewertung einer neuen aktiven Substanz, eines Hilfsstoffs oder einer Formulierung ist wichtig, wenn ein Medikament in lichtexponierte Gewebe, wie Haut oder Augen, verteilt werden könnte. Eine solche Bewertung sollte vor klinischen Studien durchgeführt werden, um unnötige Schutzvorkehrungen während der Studien zu vermeiden und das Risiko, ein phototoxisches Medikament auf dem Markt zu haben, zu begrenzen.

Jedoch muss eine Substanz, um Phototoxizität zu zeigen, Sonnenlicht absorbieren und reaktive (cytotoxische) Spezies erzeugen. Diese Voraussetzungen werden in der ICH S10-Leitlinie detailliert dargestellt. Typischerweise beginnt die nichtklinische Bewertung mit der Messung des molaren Extinktionskoeffizienten (MEC) für die Substanz. Wenn im UV-Spektrum 290–700 nm, besteht eine der Strategien darin, es durch einen Zytotoxizitätstest in Balb/c 3T3-Zellen unter Bestrahlung zu bewerten. Die MEC-Messung und der Zytotoxizitätstest werden normalerweise in einer Studie kombiniert, aber ein unzureichender MEC würde diese Studie frühzeitig abbrechen.

Der Zytotoxizitätstest unter Bestrahlung sollte der OECD-Testleitlinie 432 folgen. Er wird für lösliche aktive Substanzen und Hilfsstoffe empfohlen, während topisch aufgetragene Formulierungen stattdessen in einem Hautmodell getestet werden könnten (gemäß z.B. der OECD-Testleitlinie 498). Dies könnte auch für Substanzen der Fall sein, die UVB-Licht absorbieren oder für schlecht lösliche Substanzen. Wichtig ist, dass ein positives Ergebnis aus dem Zytotoxizitätstest nicht immer als klinisch relevant angesehen wird. Auch sollten aufgrund der geringeren Empfindlichkeit von Tests in Hautmodellen höhere Konzentrationen oder längere Expositionszeiten als in der klinischen Studie in Betracht gezogen werden.

Wir unterstützen Sie gerne mit in vitro Phototoxizitätstests in unseren GLP-zertifizierten Laboren.

Stoffe in der Pharmaindustrie müssen eventuell auf chemische Sicherheit geprüft werden

Innerhalb der Europäischen Union sind Arzneimittel (z. B. Wirkstoffe, Hilfsstoffe, Verunreinigungen und Formulierungen) von der Registrierung als Chemikalien befreit. Weiterhin müssen Arzneimittel sowie Stoffe in Forschung und Entwicklung und nicht isolierte Zwischenstufen nicht klassifiziert werden (gemäß CLP, EC 1272/2008) für etwaige chemische Gefahren.

Dennoch können Chemikalien, die als Rohstoffe verwendet werden und nach Europa importiert werden, oder isolierte Zwischenstufen (wenn das Volumen über 1 Tonne pro Jahr liegt) sowohl klassifiziert als auch registriert werden müssen. Darüber hinaus können pharmazeutische Hersteller freiwillig ihre Zwischenprodukte und Arzneimittel bewerten und klassifizieren, z. B. um Arbeitsschutzstandards zu gewährleisten oder um nationale gesetzliche Anforderungen zu erfüllen.

Um chemische Risikobewertungen zu unterstützen, bieten wir eine breite Palette von toxikologischen Tests und regulatorischen Beratungsunterstützungen an. Für weitere Informationen zu Tests kontaktieren Sie uns: info@iccr-rossdorf.de

Gewebe - Haut

Hautirritation: Prüfung mit Rekonstituierter humaner Epidermis
- OECD 439 / ISO 10993-23
Hautkorrosivität: Prüfung mit Rekonstituierter humaner Epidermis
- OECD 431
Hautkorrosivität: Corrositex – In-Vitro Membranbarriere-Test
- OECD 435

Gewebe - Auge

Augenirritation: Prüfung mit Rekonstituierten humanen Cornea-ähnlichen Epithelien
- OECD 492 / OECD 492B
Augenreizung: Test mit Rinderaugen auf Opazität und Permeabilität (BCOP)
- OECD 437
Augenreizung: Test mit Kurzzeitexposition zur Identifizierung von Augenschädigungen (STE)
- OECD 491
Augenreizung: Hühnerei-Test – Chorioallantois-Membran (HET-CAM)
- INVITTOX Protokoll Nr. 47